一種蚓激酶制備工藝（蚯蚓專利）

申請專利號 CN99112806.0 　
專利申請日 1999.04.01 　
名稱 一種蚓激酶制備工藝　 　
公開（公告）號 CN1229852
公開（公告）日 1999.09.29 　
類別 化學；冶金
頒證日 　
優先權  
申請（專利權） 長春高斯達生化藥業集團股份有限公司 　
地址 130041吉林省長春市柳條路2號　
發明（設計）人 孫啟良; 馮來坤 　
國際申請  
國際公布  
進入國家日期 　
專利代理機構 吉林省專利服務中心 　
代理人 陳宏偉 　
摘要
本發明公開了一種蚓激酶制備工藝，將蚯蚓經生理鹽水處理，采用勻漿、凍融法制備蚯蚓粗提物，然后通過超濾、親和層析、離子交換及分子篩等技術組合，從蚯蚓中提取純化三種有纖溶活性的蚓激酶，其分子量分別為３．０±０．２萬、２．５±０．２萬及２．２±０．２萬的三種蛋白質，其純度分別達到ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝膠電泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）顯示一條帶，高效液相色譜（ＨＰＬＣ）呈現一個峰的水平，其纖溶活性均為每mg含相當于尿激酶活性１０００單位以上。體外溶血栓試驗證明有良好的直接溶栓作用；動物體內試驗證明，其體內溶血栓活性優于尿激酶。 　
主權項
1、一種蚓激酶制備工藝，包括以下工藝制備：將蚯蚓用清水洗凈泥土，加入生理鹽水沖洗處理，按（V／V） 1：3～5的比例加入 0．2MpH4．6 ～ 4.8的檸檬酸鈉制成勻漿，經1000～4000rpm離心20～40 分鐘，取上清液，通過超濾法去除大分子蛋白，濾液用親和層析法初步純化，，收集活性組分，再通過離子交換柱進一步純化，取其活性組分，再經分子篩層析，分段收集各個活性組分，取分子量為3．0 ± 0．2萬、2．5±0．2萬及2．2＋0．2萬的三種活性蛋白質。